1　范圍

本標準規定了牛冷凍精液人工授精技術要求。

本標準適用于通遼地區養牛場（戶）和人工授精站。

2　規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T 5458  液氮生物容器

NY/T 1335  牛人工授精技術規程

    DB1505/T 074  牛妊娠診斷技術規程

3　術語和定義

    下列術語和定義適用于本標準。

3.1　冷凍精液

指利用器械以人工方法采集種公牛精液，經過檢查、稀釋、平衡并利用液氮冷凍、保存。

3.2　解凍

冷凍精液細管直接置于38℃～40℃水浴中，恢復精子活力的處理方法。

3.3　人工授精

是指利用器械以人工方法采集種公牛精液，經過檢查、稀釋、平衡、冷凍、保存及解凍等的特定處理后，用器械輸入發情母牛的生殖道中，使母牛妊娠的一種繁殖技術。

3.4　發情鑒定

    通過觀察或檢查母牛外部行為征兆和內部生殖器官變化，判斷卵巢卵子發育和排出等活動情況和發情階段。

3.5　妊娠檢查

通過母牛外部征兆觀察、直腸檢查和儀器檢查等確定母牛是否妊娠的技術。

4　母牛發情鑒定

4.1　外觀表現

通過觀察母牛外部行為征兆判斷母牛發情階段，見附錄A。

4.2　直腸檢查

通過直腸檢查卵巢、觸摸卵泡發育狀況，判斷母牛發情排卵時間，見附錄B。

4.3　電子發情監測法

將母牛行為監測儀安放在母牛的適當部位，采集母牛的行為活動量；將觸發天線安裝于母牛出入口，當母牛經過觸發天線時，激活母牛行為檢測儀，并將母牛身份和母牛行為活動量等識別信息數據經過編碼、調制后發送至無線讀寫控制器；計算機管理信息系統軟件通過對各個母牛行為活動量掌握牛只的發情狀況、配種時間。

4.4　尾根噴漆法

將鑒定母牛每天在尾跟上部噴漆或專用蠟筆涂抹，根據有漆和無漆確定母牛發情。記錄發情牛的第一次穩爬時間、發情結束時間以及發情持續時間。準確推算適時配種。

4.5　適時輸精

母牛接受爬跨行為后10h～15h第一次輸精,然后隔8h～12h可再輸一次。

5　凍精質量、貯存和運輸

5.1　凍精質量

5.1.1　活力、密度、有效精子數、畸形率、細菌數等質量符合NY/T 1335要求。

5.1.2　細管完整，字跡清楚，應有生產單位簡稱、品種、編號、生產日期。

5.1.3　裝細管凍精的紗布口袋干凈，標簽清楚。

5.1.4　凍精在購進、入庫和輸精前進行質量檢測。

5.2　凍精貯存

凍精貯存于液氮生物容器（液氮罐）的液氮中。液氮罐應符合GB/T 5458的規定。及時添加液氮，保證凍精始終浸在液氮中，保持液氮面高于凍精。應經常檢查液氮罐的狀況，保證液氮容器完好，液氮罐出現外殼結白霜應立即更換。定期清洗液氮罐。

5.3　凍精運輸

運輸凍精時，應使用專用液氮容器（有保護外套）,添滿液氮，固定容器蓋，液氮罐不得倒放及碰撞和強烈震蕩。遠途運輸凍精時，備足液氮，及時補加。

6　輸精前準備

6.1　母牛保定

將待輸精的母牛保定, 尾巴向右上方拴系提起。

6.2　選取凍精

取下液氮罐蓋，選擇所需凍精筒或凍精紗布袋。用鑷子準確選出所需的凍精，核對細管凍精標記的公牛編號，應與預配公牛號相符。迅速放置恒溫水浴鍋中解凍，凍精在液氮外停留時間不應超過5s。蓋上液氮罐蓋。

6.3　解凍

6.3.1　凍精解凍溫度應在38℃～40℃,時間是15s～20s。凍精的棉塞端朝下在恒溫水浴鍋中緩慢搖動。

6.3.2　解凍后精液應在1h內及時輸精。冬季外界溫度低時應做好精液保溫。

6.4　裝輸精槍

6.4.1　凍精解凍后,用紙巾吸干。

6.4.2　持細管的末端,應盡快地將細管的棉塞端穿入輸精槍（采用塑料套管式金屬輸精器）內。將裝好的授精槍垂直握住,用潔凈、干燥剪刀剪切凍精細管封口端10mm處。

6.4.3　取出槍套將槍管套上,用手捻槍套向下直到槍的圓錐座處,只觸摸槍套的開口端,以保持接觸牛的一端清潔。應使用具有雙層保護的輸精槍外套。

7　輸精

7.1　輸精員應修剪指甲。

7.2　母牛在輸精前外陰部應用清水清洗,然后用 0.3‰新潔爾滅溶液或酒精棉球消毒,待干燥后,再用生理鹽水棉球擦拭。

7.3　發情母牛每次輸入1支解凍后的冷凍精液。

7.4　采用直腸把握子宮頸深部輸精法。輸精員一只手戴上一次性長臂手套,用水沾濕,手呈錐形,手心向上伸入直腸后手心轉下,找到并握住子宮頸,同時臂肘向下輕壓,使陰門張開。另一只手將輸精器插入陰道,先自陰門向前向上插入約13cm～17cm,再向前向下插入,兩手相互配合,使輸精器尖端對準子宮頸口, 緩緩導入子宮頸內5cm～8cm,然后注入精液,亦可在進入子宮頸內口1cm～4cm的子宮體部輸精。輸精應做到輕入、慢注、緩出。

8　做好配種記錄

記錄應及時、準確，見表1。

表1　母牛配種記錄表

序號

畜 主 姓 名

畜 主 住 址

牛 耳 號

母 牛 品 種

母 牛 年 齡

母 牛 胎 次

發 情 時 間

輸 精 時 間

凍 精 編 號

凍 精 來 源

復 配 時 間

預 產 期

9　妊娠檢查

采用外部觀察法和直腸檢查法，執行DB1505/T 074。

10　 效果評定指標

第一情期受胎率：指第一情期輸精后，妊娠母牛頭數占輸精母牛頭數的百分比。

    第一情期受胎率=

    平均情期受胎率=

    總受胎率=

    產犢率=

    犢牛成活率=

    繁殖成活率=